突破传统蛋白质印迹法的限制
在具有生理相关性的内源性模型中检测低丰度蛋白质是一项具有挑战性的任务。虽然传统的蛋白质印迹法是一种基础技术，但它存在转印损失、半定量读数、操作流程耗时以及泳道间变异性等问题。低丰度蛋白的信号常与背景信号重叠，且手动蛋白质印迹法步骤带来的变异性会使细微的表达变化难以解读。加之珍贵样品数量有限，难以重复实验，这些挑战愈发严峻。
在本次网络研讨会中，我们重点介绍提升内源性蛋白检测灵敏度和可重复性的实用方法，并解决关键的生物学难题，例如在传统蛋白质印迹法可能失效的情况下检测低丰度蛋白。我们将展示如何利用 Simple Western 技术增强的灵敏度，结合 Cell Signaling Technology (CST) 经过严格验证、具有应用特异性和可重复性的顶级抗体，克服这些方法学障碍，仅需约 3 小时即可从极少量样品中获得定量结果。该方法证明了 Simple Western 如何为此前被归类为“仅限转染”的抗体开辟了新的应用前景——这类抗体虽能可靠地检测过表达的重组蛋白，但传统蛋白质印迹法却因灵敏度不足而无法稳定检测其内源性靶标。
本次网络研讨会由 Cell Signaling Technology 的 Frank He 主持。Bio-Techne 的 Francisco Ramirez 将介绍 Simple Western 平台及实验设计注意事项，而 CST 的 Chris LaBreck 博士将分享数据，展示经过高度验证的抗体如何结合高灵敏度工作流程，在天然系统中对低丰度内源性蛋白质进行可靠、定量的检测。